高效液相色谱法
概述：液相色谱法是一种以液体为活动相的柱色谱分散与分析武艺，于20世纪70年代创建起来的。干系于以气体为活动相的气相色谱而言，以液体为活动相的任何一种色谱历程均称为液相色谱。由于液相色谱法高效、快速，之后取得敏捷的提高，在经典的液相色谱法的基本上，吸取了气相色谱法的实际和实践武艺，并接纳高压输液泵、高效安稳相和高敏捷度检测器等安装，完成了分析速率快、分散听从高和利用主动化，这种柱色谱武艺成为高效液相色谱法，又称为高压液相色谱法。
高效液相色谱仪
活动相的差别决定了液相色谱仪敦睦相色谱仪的不同。高效液相色谱仪包含高压输液泵、梯度淋洗安装、进样安装、色谱柱、检测器和纪录体系等主要部件，其事情流程：贮液器中储存的活动相经高压泵送到色谱柱冲洗柱子，当柱子均衡并且基线安稳后，试样经过注射器进入进样器，然后由活动相把试样送到色谱柱中举行分散，分散后的组分由检测器检测，输入的信号经过扩大器扩大后用纪录仪纪录下去。
高压输液泵
用来运送活动相，应具有流量安定而并且无脉动，并有较大的调治范围，由于流量不仅影响柱效能，还直接影响峰面积的重现性和保存值的准确性等，且活动相的压力均衡可使检测器噪声低落。别的还应具有有较高的输入压力、能抗化学腐化、泵的死体积要小、利用与查验便利等条件。
梯度淋洗安装
关于繁复样品，组分的k（容量因子）值范围很宽，接纳等度洗脱时屡屡不克不及满意要求，可接纳梯度洗脱，即在分散历程中，构成活动相的是两种或两种以上的不同溶剂，按一定步骤一连改动配比、极性、PH值和离子强度，从而到达提高分散后果和分析速率的目标，梯度洗脱武艺相似于气相色谱中的步骤升温武艺。
进样安装
进样安装的作用是把分析样品好效地送入色谱柱中举行分散。由于高效液相色谱柱子较短，安稳相颗粒较细，进入柱中的样品在活动相中分散越敏捷，则色谱峰就越宽，因此，进样时要求样品在抵达柱头前，不与活动相殽杂，直接注射到柱头中央即所谓“点进样”。进样办法通常有：隔膜进样、停留进样、阀进样和主动进样等。
色谱柱
色谱柱是色谱分散的中心局部，分散后果的优劣主要决定于色谱柱的功能。通常接纳添补柱，即按一定的办法把安稳相填入柱中，色谱柱由色谱柱管和添补的安稳相构成，安稳相是色谱分散的紧张局部。对色谱柱管的要求是耐高压、耐腐化。寻常接纳厚壁的玻璃管或内壁颠末抛光的不锈钢控制成，常用的柱内径为1~6nm，柱长10~30cm，柱子的外形为直形柱，柱子的尺寸及外形的选择要思索添补的难易和柱效的上下。
检测器
高效液相色谱对检测器的要求是敏捷度高、重现性好、线性范围宽、噪声低、定量准确、对温度和流量的厘革不敏感等，权衡检测器功能的一些标准寻常仍相沿气相色谱检测器的表现办法。高效液相色谱的检测器寻常分为两类：一类是通用型检测器（即总体性检测器），它对试样和活动相总的物理或化学实质有呼应，属于这类检测器的有示差折光检测器和电导检测器。这类检测器使用范围广，但是由于它对溶剂（活动相）也有呼应，因此易受温度、流量厘革的影响，形成较大的噪声和漂移，不克不及用于梯度淋洗，敏捷度较低，不合适痕量分析。另一类是选择性检测器（溶质性检测器），它仅对被分散组分的物理或化学特性有呼应，对活动相无呼应或呼应很小，如紫外吸取检测器和荧光检测器等都属于这一类。该类检测器敏捷度高，受外界影响小，可用于梯度淋洗，但使用范围遭到限定。
