固相萃取的事情原理和利用步调
固相萃取的基本原理
固相萃取(SPE)是使用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分散,然后再用洗脱液洗脱,到达分散和和富集的目标。先使液体样品经过一装有吸附剂(固相)小柱,保存此中某些组分,再选用得当的溶剂冲洗杂质,然后用少数溶剂敏捷洗脱,从而到达快速分散过滤与浓缩的目标。SPE可以用于一切典范样品的处理,但是液体样品是最容易处理的。
固相萃取的分散形式
1.反相固相萃取
-吸附剂(安稳相)好坏极性或弱极性的,如硅胶键合C18,C8,C4,C2,-苯基等。活动相为极性(水溶液)或中等极性样品基质。
-吸附剂的极性小于洗脱液的极性。
-使用:可以从强极性的溶剂中(如水样)萃取好坏极性或弱极性的化合物。
-作用机理:非极性-非极性互相作用,如范德华力或色散力。
天然溶剂非极性排序:
正己烷>环己烷>四氯化碳>甲苯>苯>无水乙醚>氯仿>二氯甲烷>四氢呋喃>乙酸乙酯>丙酮>乙腈>异丙醇>甲醇>水>乙酸
2.正相固相萃取
·吸附剂:极性键合相,如硅胶键合-NH2、-CN,-Diol(二醇基);极性吸附剂,如 silica florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等。活动相为中等极性到非极性样品基质。
·作用机理:
☆极性-极性互相作用
☆外表硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官能团之间互相作用,包含氢键,π-π键等。
☆偶极-偶极互相作用
☆偶极-诱导偶极互相作用
-使用:从非极性溶剂样品中萃取极性化合物除此之外,另有离子互换萃取和免疫亲和两种分散形式。
固相萃取的利用步调
一个完备的固相萃取步调包含固相萃取柱的预理、上样、洗去干扰物质、洗脱及搜集分析物个步调。
1.固相萃取柱的预处理
·一是为了润湿和活化固相萃取填料,二是为了撤除填料中约莫存在的杂
质,变小沾染。
·接纳的办法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。
·反相典范的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性天然溶剂如甲醇预处理,然后用水或缓冲溶液交换滞留在柱中的甲醇。
·正相典范的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常用样品地点的天然溶剂来预处理。
·离子互换填料寻常用3~5mL去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。
·固相萃取填料从预处理到样品到场都应坚持湿润,假如在样品加人之前,萃取柱中的填料干了,必要反复预处理历程。
2.上样
将样品倒入活化后的SPE小柱,然后使用加压、抽真空或离心的办法使样品进入吸附剂。接纳手动或泵以正压推进或负压抽吸办法,使液体样品以得当流速经过固相萃取柱,此时,样品中的目标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。
3.洗去干扰物质
·目标是为了撤除吸附在固相萃取柱上的少数基体干扰组分。
·寻常选择中等强度的殽杂溶剂,尽约莫撤除基体中的干扰组分,又不会招致目标萃取物流失。
·反相萃取体系常选用一定比例构成的天然溶剂-水殽杂液,天然溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。
4.洗脱及搜集分析物
-选择得当的洗脱溶剂洗脱被分析物,搜集洗脱液,挥干溶剂以备后用或直接举行在线分析。-为了尽约莫将分析物洗脱,使比分析物吸附更强的杂质留在SPE柱上,必要选择强度切合的洗脱溶剂。